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人ELISA检测试剂盒免费代测

更新时间:2024-07-05

简要描述:

人ELISA检测试剂盒免费代测
上海研尊生物长期专业供应ELISA试剂盒,产品种类齐全,包括人、大小鼠、牛羊马猴鱼等各种种属的ELISA试剂盒。本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本待测物质水平。所有试剂盒提供产品检测报告和精准的数据。
产品详细说明书:联系销售人员获取说明书

型号:人ELISA试剂盒48T/96T点击量:1612
品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

人ELISA检测试剂盒免费代测

用途
该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中浓度。
 
 
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的抗原会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与结合在包被抗体上的抗原结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,抗原浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中指标的浓度。
 

反应类型夹心法
规格96T
反应时间4.5h
反应性通用
检测方法Colormetric
灵敏度检测下线除以10
样本体积100μL
样本类型血清、血浆或其他相关生物液体
特异性可检测样本中的指标,且与其它相关蛋白无明显交叉反应
重复性板内,板间变异系数均<10%

 
样品活化方法
生物样品中的通常以无活性的形式存在,在检测指标活性前必须进行活化处理。
活化方法如下:
血清、血浆: 280 μL标准品&样品稀释液中加入40 μL样品,混匀,加入40 μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40 μL活化试剂2,混匀后立即检测。
注意:样品被稀释了10倍!
细胞培养上清:20 μL标准品&样品稀释液中加入100 μL样品,混匀,加入40 μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40 μL活化试剂2,混匀后立即检测。
注意:样品被稀释了2倍!
组织匀浆:1960 μL标准品&样品稀释液中加入40 μL样品,混匀后检测。
注意:样品被稀释了50倍!
 
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

 批内变异系数批间变异系数
样本123123
数量202020202020
平均值( MERGEFIELD 单位ng/mL)0.411.074.960.471.254.24
标准差0.020.050.220.030.060.2
变异系数 (%)4.884.674.436.384.84.72

 
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

样本类型回收率范围 (%)平均回收率 (%)
血清(n=5)94-110102
血浆(EDTA)(n=5)90-10296
细胞上清(n=5)95-10698

 
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

  血清(n=5)血浆(EDTA)(n=5)细胞上清(n=5)
1:2回收率范围(%)99-10895-10592-104
平均回收率(%)10510297
1:4回收率范围(%)95-10990-10097-105
平均回收率(%)10296100
1:8回收率范围(%)89-10389-10496-108
平均回收率(%)9797102
1:16回收率范围(%)88-10298-10892-105
平均回收率(%)94104100

 
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

试剂盒组成48孔配置96孔配置
说明书1份1份
封板膜2片2片
密封袋1个1个
酶标包被板1×481×96
标准品0.3ml×6管0.3ml×6管
酶标试剂5 ml×1瓶10 ml×1瓶
样品稀释液3 ml×1瓶6 ml×1瓶
显色剂A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶
显色剂B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶
终止液3 ml×1瓶6 ml×1瓶
20×浓缩洗涤液15ml×1瓶25ml×1瓶
试剂盒组成48孔配置96孔配置
说明书1份1份
封板膜2片2片
密封袋1个1个

说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
 
人ELISA检测试剂盒免费代测
操作步骤
1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。
4. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
7. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 
8. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
9. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
 
试验所需自备物品
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
4. 吸水纸

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